力鈞提供最新基因組編譯工具 - CRISPR-Cas9 System
一次服務完成靶點設計與載體構築
讓您快速進行基因組編譯工作
CRISPR 構築服務 & CRISPR 快速建構試劑盒
New !! Low off-target Vector Cas9 1.1
適合細胞基因剔除 CAG Promoter / T7 Promoter 具兩種篩選:螢光+抗生素 EGFP + Puromycin / mCherry + puro
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質體構築服務 pZG22C021.1
快速構築試劑組 pZG22C021.1K-10(10rxn) pZG22C021.1K-25 (25rxn)
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力鈞胚胎專用CRISPR/Cas9載體 :
is suitable for animal embryo injection ( injection in vitro transcribed RNA of Cas9 and gRNA )
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RGN1 胚胎專用(In-vitro transcription) 適合大小鼠 斑馬魚 胚胎顯微注射 T7 Promoter
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質體構築服務 pZG11C01
快速構築試劑組 pZG11C01K-10(10rxn) pZG11C01K-25 (25rxn)
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質體構築服務 pZG11C01
快速構築試劑組 pZG11C01K-10(10rxn) pZG11C01K-25 (25rxn)
RGN6 胚胎專用(In-vitro transcription) 適合大小鼠 斑馬魚 胚胎顯微注射 T7 Promoter / CAG Promoter 也可應用於細胞
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質體構築服務 pZG21C01
快速構築試劑組 pZG21C01K-10(10rxn) pZG21C01K-25 (25rxn)
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質體構築服務 pZG21C01
快速構築試劑組 pZG21C01K-10(10rxn) pZG21C01K-25 (25rxn)
胚胎專用(In-vitro transcription) 適合大小鼠 斑馬魚 胚胎顯微注射 T7 Promoter / D10A Cas9 可有效降低off-target effect
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質體構築服務 pZG11D01
快速構築試劑組 pZG11D01K-10(10rxn) pZG11D01K-25 (25rxn)
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快速構築試劑組 pZG11D01K-10(10rxn) pZG11D01K-25 (25rxn)
CRISPR 常見問題:
1. 各式多合一載體,我們將gRAN Cas9 篩選標記設計在一個載體進行轉染,增加轉染效率
2. 多合一載體不需要計算sgRNA 和Cas9濃度
3. 可選擇抗生素篩選,是螢光篩選或是二合一篩選,選擇篩選Marker主要是篩選轉染效率建議效率需>20%以上再往下進行
4. 螢光及抗生素載體大約在一星期後會漸漸被踢出,螢光及抗生素抗性漸漸失去,請用原本條件進行細胞培養
5. 篩選出的細胞請以單細胞培養,若時間較趕可選擇2-3次方細胞 low cell DNA Kit 粹取DNA,來進行突變篩選
6. 用T7E1酵素進行酶切,切的動的再送定序檢測
7. 基因剔除的細胞大部份為Heterozygous,只有很小的機率為homozygote,若無法挑到homo細胞株,請用Heter細胞株再重新進行
一次轉染
RGN7 適合細胞基因剔除 CAG Promoter 傳統型 無篩選標記
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質體構築服務 pZG22C01
快速構築試劑組 pZG22C01K-10(10rxn) pZG22C01K-25 (25rxn)
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質體構築服務 pZG22C01
快速構築試劑組 pZG22C01K-10(10rxn) pZG22C01K-25 (25rxn)
RGN5P/N 適合細胞基因剔除 可選擇 CMV 或 CAG Promoter 篩選標記可選擇 Puromycin 或 Neomycin 抗生素篩選
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質體構築服務 pZG12C01P/N 快速構築試劑組 pZG12C01P/N 1K-10(10rxn) pZG12C01P/NK-25 (25rxn)
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質體構築服務 pZG12C01P/N 快速構築試劑組 pZG12C01P/N 1K-10(10rxn) pZG12C01P/NK-25 (25rxn)
RGN3 G/R/Y 適合細胞基因剔除 CMV 或 CAG Promoter 篩選標記可選擇 eGFP / mCherry / eYFP 螢光篩選
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質體構築服務 pZG12C02 G/R 快速構築試劑組 pZG12C01G/RK-10(10rxn) pZG12C01G/RK-25 (25rxn)
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質體構築服務 pZG12C02 G/R 快速構築試劑組 pZG12C01G/RK-10(10rxn) pZG12C01G/RK-25 (25rxn)
適合細胞基因剔除 CMV Promoter 具兩種篩選:螢光+抗生素 EGFP + Puromycin
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質體構築服務 pZG12C03
快速構築試劑組 pZG12C03K-10(10rxn) pZG12C03K-25 (25rxn)
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質體構築服務 pZG12C03
快速構築試劑組 pZG12C03K-10(10rxn) pZG12C03K-25 (25rxn)
RGN8 適合細胞基因剔除 CAG Promoter / T7 Promoter 具兩種篩選:螢光+抗生素 GFP + Puromycin / mcherry+Puro
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質體構築服務 pZG22C02
快速構築試劑組 pZG22C02K-10(10rxn) pZG22C02K-25 (25rxn)
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質體構築服務 pZG22C02
快速構築試劑組 pZG22C02K-10(10rxn) pZG22C02K-25 (25rxn)
D10A Nickase Cas9 細胞專用載體 |
D10A Nickase Cas9 細胞專用基因剔除 需要一對才可進行基因剔除 CMV Promoter / Neomycine Or Puromycin
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質體構築服務 pZG12D01N 快速構築試劑組 pZG12D01NK-10(10rxn) pZG12D01NK-25 (25rxn)
質體構築服務 pZG12D01P 快速構築試劑組 pZG12D01PK-10(10rxn) pZG12D01PK-25 (25rxn)
需一對才可進行10rxn 可合成10條CRISPR 所以只能進行5次基因基因剔除
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質體構築服務 pZG12D01N 快速構築試劑組 pZG12D01NK-10(10rxn) pZG12D01NK-25 (25rxn)
質體構築服務 pZG12D01P 快速構築試劑組 pZG12D01PK-10(10rxn) pZG12D01PK-25 (25rxn)
需一對才可進行10rxn 可合成10條CRISPR 所以只能進行5次基因基因剔除
D10A Nickase Cas9 細胞專用基因剔除 需要一對才可進行基因剔除 CMV Promoter / EGFP / mCherry / EYFP
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質體構築服務 pZG12D02 G/R/Y
快速構築試劑組 pZG12D02 G/R/Y K-10(10rxn) pZG12D02 G/R/Y K-25 (25rxn)
需一對才可進行10rxn 可合成10條CRISPR 所以只能進行5次基因基因剔除
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質體構築服務 pZG12D02 G/R/Y
快速構築試劑組 pZG12D02 G/R/Y K-10(10rxn) pZG12D02 G/R/Y K-25 (25rxn)
需一對才可進行10rxn 可合成10條CRISPR 所以只能進行5次基因基因剔除
慢病毒專用載體 Lenti virus Vector
For Lentivirus vector : 5' LTR / RRE / Puromycin / eGFP / mCherry / 3' LTR
昆蟲專用 CRISPR/Cas9 (for Insect CRISPR /Cas9)
CRISPR/Cas9 D10A nicknase
一般型cas9 與 Cas9 D10A Nicknase 差別在 一般型Cas9載體只有一個sgRNA(可切雙股DNA)Cas9 D10A Nicknase 載體(只能切單股DNA)需要正向及反相各設計一個sgRNA,一次要兩個sgRNA,距離要在50bp以內可造成雙股DNA被切 如下圖圖示,可有效降低off-target effect,但剔除效率會一般型低一些