ZGBV Site-directed Mutagenesis KIT
快速定點突變試劑盒
Site-directed Mutagenesis
Mut Express II Fast Mutagenesis Kit
Design
• Primers anneal to the DNA template, mutant strands are synthesized with TransStart® FastPfu DNA Polymerase.
• In vitro digestion of non-mutated parental plasmid (methylated plasmid) with DMT enzyme and in vivo degradation of
non-mutated parental plasmid (methylated plasmid) with DMT Chemically Competent Cell, so as to efficiently select
mutant clones
Mut Express II Fast Mutagenesis Kit
Design
• Primers anneal to the DNA template, mutant strands are synthesized with TransStart® FastPfu DNA Polymerase.
• In vitro digestion of non-mutated parental plasmid (methylated plasmid) with DMT enzyme and in vivo degradation of
non-mutated parental plasmid (methylated plasmid) with DMT Chemically Competent Cell, so as to efficiently select
mutant clones
產品特點
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• Max Super-Fidelity DNA Polymerase提供突變率最低的高保真PCR
• Super-Fidelity DNA Polymerase卓越的長片段放大能力，廣泛應用於20 kb以內的任何質體放大 • 放大產物經DpnI消化後可直接用於重組反應 • 可對目標質體上單個位點或兩個不連續位點(相距超過50 bp)同時進行定點突變 • 放大以指數方式進行，極大減少了模版使用量，有利於原始甲基化模版的徹底降解 |
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產品介紹
Mut Express II Fast Mutagenesis Kit 是基於ClonExpress 無縫克隆技術的定點突變統。使用本試劑盒，目標質體放大產物經DpnI消化、ClonExpress 重組環化後直接進行轉化即可完成定點突變。該試劑盒由 Max Super-Fidelity DNA Polymerase放大模塊和ClonExpress無縫克隆模塊組成。Max Super-Fidelity DNA Polymerase超高的保真度顯著降低了放大過程中產生新突變的可能性。高度優化的緩衝液、快速簡單的操作流程以及極高的成功率，使得Mut Express II Fast Mutagenesis Kit 成為DNA定點突變首選試劑盒。
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Mut Express MultiS Fast Mutagenesis Kit V2
產品編號： ZGVC215-01/02 10rxn / 25 rxn
產品特點
● Max Super-Fidelity DNA Polymerase提供突變率最低的高保真PCR
● Max Super-Fidelity DNA Polymerase卓越的長片段放大能力，廣泛適用於20 kb以內任何質體的放大
● 放大以指數方式進行，模板使用量極低，有利於原始甲基化模板的徹底降解
● ZFusion one step fsat cloning 系統高效環化PCR產物
● DpnI消除原始模板污染
● 可一步實現目標質體上三至五個不連續位點(相距超過50 bp)的定點突變
產品特點
● Max Super-Fidelity DNA Polymerase提供突變率最低的高保真PCR
● Max Super-Fidelity DNA Polymerase卓越的長片段放大能力，廣泛適用於20 kb以內任何質體的放大
● 放大以指數方式進行，模板使用量極低，有利於原始甲基化模板的徹底降解
● ZFusion one step fsat cloning 系統高效環化PCR產物
● DpnI消除原始模板污染
● 可一步實現目標質體上三至五個不連續位點(相距超過50 bp)的定點突變
產品介紹
Mut Express MultiS Fast Mutagenesis Kit V2放大試劑升級為Max Super-Fidelity DNA Polymerase，放大能力更強、模板相容性更廣且高GC片段放大成功率顯著提高。此外，試劑盒最佳化了引子設計方式：由“每對正反向引子5’端包含至少20 bp反向互補區域”修改為“每對正反向引子5’端包含15-21 bp反向互補區域(GC含量40% - 60%為佳)，各引子待突變位點至3’端區域Tm值高於60℃為佳”。高度最佳化的反應緩衝液、快捷的操作流程以及更高的定點突變成功率，使得Mut Express® MultiS Fast Mutagenesis Kit V2成為DNA多點突變首選試劑盒。
Mut Express MultiS Fast Mutagenesis Kit V2放大試劑升級為Max Super-Fidelity DNA Polymerase，放大能力更強、模板相容性更廣且高GC片段放大成功率顯著提高。此外，試劑盒最佳化了引子設計方式：由“每對正反向引子5’端包含至少20 bp反向互補區域”修改為“每對正反向引子5’端包含15-21 bp反向互補區域(GC含量40% - 60%為佳)，各引子待突變位點至3’端區域Tm值高於60℃為佳”。高度最佳化的反應緩衝液、快捷的操作流程以及更高的定點突變成功率，使得Mut Express® MultiS Fast Mutagenesis Kit V2成為DNA多點突變首選試劑盒。
圖1.突變引子設計示意圖
圖2. 使用Mut Express® MultiS進行不連續三點突變實驗流程。
以待突變位點A、B、C為界，將質體分為AB、BC和CA三段。在每個待突變位元點處設計部分反向互補的引子。以原始質體為模板，分別放大AB段(A Forward Primer 和B Reverse Primer)、BC段(B Forward Primer 和C Reverse Primer)和CA段(C Forward Primer 和A Reverse Primer) (I)。放大產物經DpnI消化(I)後，進行重組環化(II)。重組產物直接進行轉化即可完成定點突變(III)。 |
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