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PCR (Polymerase Chain Reaction)
​是當今分子生物學技術的基石之一。PCR技術已經成為一種日常的實驗手段,應用於如分子選殖、基因表達分析、genotyping、定序等領域。Zgenebio為您提供從一般PCR、長片段PCR到高保真PCR、直接PCR等全套的PCR解決方案。我們有信心通過高品質的產品,如高保真聚合酶,加上我們技術支持團隊的全面優化方案,可幫助您完成最複雜、最具挑戰性的PCR放大。

超高保真酵素
正確度
放大片段
放大速率
平端
Max Super-Fidelity
一般Taq 的53倍
放大 40Kb  DNA片段
 2Kb/秒
平端
Super-Fidelity
一般Taq 的52倍
放大 20Kb  DNA片段
 2Kb/秒
平端

Super-Fidelity DNA Polymerase 超保真耐熱核酸聚合酶


2 × Phanta Flash Master Mix​ (ZGVP510-01/02)  81倍~超保真耐熱核酸聚合酶

 1.極速擴增
使用2 × Phanta® Flash Master Mix(P510)和2 × Phanta® Flash Master Mix (Dye Plus)(P520)以及市售其他品牌高保真酶(TB1、TB2),採用1 sec/kb的延伸速度擴增353 bp、873 bp的目的片段,採用4 sec/kb和5 sec/kb的延伸速度擴增7,140 bp的目的片段。結果顯示,P510和P520均可成功擴增。
2.高保真度
採用LacI分析方法測定不同聚合酶的擴增保真度,結果顯示,Phanta® Flash(P510、P520)的保真度可達Taq DNA Polymerase的81倍。
​3.高特異性 高專一性
使用P510、P520和市售其他品牌高保真酶,P510和P520與其他品牌高保真酶相比,擴增專一性更高。

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Phanta Max Super-Fidelity DNA Polymerase 超高保真高長度耐熱核酸酶

訂購資訊 ZGVP505

有許多樣本可直接PCR放大,不需要再抽DNA,方便快速,正確率高

超高保真 長片段放大 高效率 超強聚合酶
• 超高的保真度:是 Taq DNA Polymerase 的 53倍
• 更長的放大:可有效放大長達 40Kb 的 DNA片段
• 更快的速度:極限速度可達 2Kb/秒
• 更強的行進性:可用於各種樣本直接PCR,適用於各種 GC 含量片段放大 
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最信賴的放大保真度
Phanta Max具有超高的放大保真性,其保真度是Taq酶的53倍,Pfu酶的6倍,
顯著優於同類產品。左圖為LacI分析方法測定的不同聚合酶的放大保真度比較。
此外,Phanta Max聚合酶的保真度還通過克隆定序的方法進行了確認。長約5 kb的片段被放大並克隆至T載體,約96個單克隆進行了全長定序。
定序結果顯示,Phanta Max聚合酶的錯誤率僅為1.57 x 10-5,即每放大30萬個鹼基,錯誤低於5個。

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驚人的放大速度
以λDNA和人基因體DNA分別為模版放大2.0kb片段,延伸時間僅設置為1秒/kb、2秒/kb、5秒/kb、10秒/kb、15秒/kb、30秒/kb、60秒/kb。
可見,如進行超快速PCR檢測,Phanta Max聚合酶的延伸速度可以超過1 秒/kb;如進行高產量PCR,Phanta Max聚合酶延伸速度也可以達到30秒/kb。
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優異的高GC 放大能力
Phanta Max聚合酶能夠實現常規聚合酶無法正常放大的高GC片段的高效放大。
以人基因體為模版放大654 bp、900 bp、800 bp、1200 bp、1400 bp、426bp目標片段,各放大子GC含量均高於68%。可見,所有片段在默認條件下均可以高效放大。
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穩定的Direct Lysates PCR放大能力
相對於傳統高保真酶,Phanta Max聚合酶具有更高的模版親和力和抗抑制物能力,兩方面原因使其在粗品放大方面也有不俗的表現,已測試可放大粗品類型包括:細菌、真菌等微生物、多種全血、培養細胞、植物組織、動物組織裂解液、食品裂解液等。如圖顯示,Phanta Max可以高效放大多種Direct Lysates PCR模版。


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Phanta Super-Fidelity DNA Polymerase  超保真酵素
保真度是Taq DNA Polymerase的52倍,是Pfu DNA Polymerase的6倍
放大速度是常規聚合酶的4-150倍
廣泛的模版適應性
優化的緩衝體積廣泛適用於各種類型模版,便於快速得到理想的放大結果
提供PCR Enhancer以説明放大高GC含量的模版
提供即用型的混合液,最大程度地減少實驗步驟


產品描述
Super-Fidelity DNA Polymerase是基於Pfu DNA Polymerase改造而成的新一代超保真DNA聚合酶,具有極高的放大效率和廣泛的模版適應性,可用於幾乎所有PCR反應。經過對Pfu DNA Polymerase的基因工程改造,Super-Fidelity DNA Polymerase的行進性 (processivity)得到了大幅度提升,即使是非常複雜的模版,也能準確快速地完成反應。
Super-Fidelity DNA Polymerase的錯誤率是普通Taq酶的1/52,是Pfu DNA Polymerase的1/6。對於基因體或cDNA等複雜模版, Super-Fidelity DNA Polymerase的放大速度可以達到1 kb/15秒;而對於λ DNA或質體等簡單模版,其放大速度更能達到2 kb/1秒。高保真性以及卓越的放大效率使得Phata成為高保真PCR的首選酶。
Super-Fidelity DNA Polymerase具有5’→3’聚合酶活性和3’→5’外切酶活性,放大產物為平端,適用於單步驟快速載體構築試劑盒。5 × SF Buffer反應緩衝液對於簡單或複雜模版、短片段或長片段PCR放大都具有良好的適應性。
5 × SF Buffer反應緩衝液中包含10 mM Mg2+(1 × 終濃度為2 mM),可以使用隨酶提供的DMSO或MgSO4對反應體積進行優化。附帶的PCR Enhancer可有助於高GC含量模版的放大。



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圖1. 使用Phanta Super-Fidelity DNA Polymerase以λ DNA為模版放大長度分別為200 bp、600 bp、800 bp、1 kb、1.2 kb、2.0 kb的目標片段,延伸時間設置為1秒。所有片段均可以實現專一性高產量放大。

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圖2.使用Phanta Super-Fidelity DNA Polymerase以λ DNA為範本放大長度分別為5 kb、8 kb、10 kb、12 kb、15 kb的目標片段,延伸時間設置為3分鐘。所有片段均可以實現專一性高產量放大。

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圖3. 使用Lac I法測定,Phanta的保真性是普通Taq DNA聚合酶的52倍,是一般型Pfu DNA聚合酶的6倍。


Phanta HS Super-Fidelity DNA Polymerase 熱啟動 超高保真酵素

• 添加了單株抗體,可進行高專一性的熱啟動PCR
• 
保真度是Taq DNA Polymerase的52倍,是Pfu DNA Polymerase的6倍

• PCR 放大速度是常規聚合酶的4-150倍
• 優化的緩衝體積廣泛適用於各種類型模版,便於快速得到理想的PCR放大結果
• 提供PCR Enhancer以説明PCR放大高GC含量的模版
• 提供即用型的混合液,最大程度地減少實驗步驟

產品描述:
Phanta Super-Fidelity DNA Polymerase是一種基於Pfu DNA Polymerase改造而成的新一代超保真DNA聚合酶,具有極高的PCR 放大效率和廣泛的模版適應性,可用於幾乎所有PCR反應。經過對Pfu DNA Polymerase的基因工程改造,Phanta Super-Fidelity DNA Polymerase的行進性 (processivity)得到了大幅度提升,即使是非常複雜的模版,也能準確快速的完成反應。其錯誤率是普通Taq酶的1/52,是Pfu酶的1/6;且PCR 放大速度可以達到15秒/kb。高保真性以及卓越的PCR 放大效率使得Phanta Super-Fidelity DNA Polymerase成為高保真PCR的首選用酶。在原有基礎上,Phanta HS Super-Fidelity DNA Polymerase 中添加了在常溫下能夠抑制5’→3’聚合酶活性和3’→5’外切酶活性的兩種單株抗體,可進行高專一性的熱啟動(Hot Start)PCR。Phanta HS Super-Fidelity DNA Polymerase具有3’→5’校對活性(proofreading activity),PCR 放大產物為平端,適用於ClonExpress快速克隆試劑盒。 5 × Phanta SF反應緩衝液對於簡單或複雜模版、短片段或長片段PCRPCR 放大都具有良好的適應性。緩衝液中已經含有10 mM Mg2+(1 × 終濃度為2 mM),可以使用隨酶提供的DMSO或MgSO4對反應體積進行優化。附帶的PCR Enhancer可有助於高GC含量片段的PCR放大。
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圖1. 使用Phanta HS Super-Fidelity DNA Polymerase和Phanta Super-Fidelity DNA Polymerase以人基因體為模版放大長度為8.5 kb的目標片段。相對於Phanat而言,Phanta HS具有更高的放大效率和專一性。


Hotstar DNA Polymerase  熱啟動耐熱核酸聚合酶

Champagne Taq antibody  熱穩定Taq 單抗

訂購資訊 : ZGVP121-01 500U
Taq antibody 產品特點:
• 最耐熱的Taq酶單抗,提供最高的特異性
• 懸浮細胞發酵生產帶來最高的品質
• 與不同品牌的Taq酶均有很好的相容性
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圖1. 將市售的幾種Taq酶單抗與Taq DNA Polymerase按照活性單位1:1混合後,分別加入到polymerase reaction mix中,在55、 65℃下 不同時間後,加入PicoGreen染料測定螢光。螢光強度與聚合反應產物的量成正比, 並反映體系中未被抗體封閉的Taq酶活性的高低。 可以看到, 在各個溫度下, Champagne Taq antibody對Taq酶都具有最強的封閉效果。

Hotstar Champagne DNA Polymerase  分子診斷專用Hotstar Taq酶  快速Hostar!!

訂購資訊 : ZGVP122-D1 / D2  500U 2.5U/ul  /  5U/ul
產品特性:
• 快速失活。95°C加熱30秒即可完全失活,釋放Taq DNA polymerase活性
• 具有極高的放大效率,靈敏度和專一性。非常適合於從複雜模版 (基因體,cDNA)中放大低拷貝基因
• 對各種PCR/qPCR反應具有極佳的相容性


產品介紹
Champagne Taq DNA Polymerase是由Champagne Taq antibody與Taq酶經過最佳比例混合得到的熱啟動Taq酶。基於Champagne Taq antibody的熱穩定特性,Champagne Taq DNA Polymerase在55℃下仍可保持嚴謹的封閉性,在升溫階段非專一性被抑制到最低程度。當反應溫度升至95℃ 30s以上時,Champagne antibody徹底失活,Taq酶活性被完全釋放,確保PCR反應具有最高的放大效率和靈敏度。 與化學修飾的熱啟動Taq酶相比,Champagne Taq DNA Polymerase的啟動不受緩衝液pH、離子強度等因素的影響,因此具有更好的PCR反應相容性,是PCR/qPCR的分子診斷試劑的專用熱啟動Taq酶。
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高度的專一性和靈敏度檢測

圖1. 以1 ng-31.25 pg小鼠基因體為模版,用Champagne Taq DNA Polymerase和Taq DNA Polymerase放大tPA基因300 bp片段。

混合後立即開始PCR反應 (0 h),和在55℃放置24小時後再開始PCR反應。

看到Champagne Taq DNA Polymerase檢測可以確保高度的專一性,而且靈敏度可以達到31.25 pg 基因體(相當於10拷貝)。
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低模版放大效率檢測
圖2. 以2 pg HeLa細胞總RNA為模版,用Champagne Taq DNA Polymerase和Taq DNA Polymerase做探針法one step RT-qPCR放大CTNNB1基因,各設置8個重複。

可以看到,在低量模版下一般Taq酶幾乎不能正常放大,而Champagne TaqTM DNA Polymerase放大信號正常,且檢出率達到100% (8/8檢出)。


Hotstar DNA Polymerase   化學修飾熱啟動Taq酶

訂購資訊 : ZGVP401-D1 / D2   250U /1000U
產品特性 :
• 採用化學修飾,80℃以下完全封閉酶活
• 95℃加熱5分鐘即可釋放活性
• 適用於從複雜模版(基因體, cDNA)中放大低拷貝基因
• 提供即用型的混合液,最大程度地減少實驗步驟


產品介紹 :
Hotstar DNA Polymerase是經過化學修飾的Taq DNA Polymerase,在溫度低於80℃時活性被完全封閉,可防止在樣品準備及反應升溫階段產生非專一放大和引子二聚體。 只有經過95℃加熱後活性才被釋放。與其它熱啟動方法相比,  Hotstar Taq ® DNA Polymerase具有最高的嚴謹性;與現有化學修飾的熱啟動Taq酶相比,  Hotstar Taq  DNA Polymerase的啟動只需要5分鐘,相容現有的PCR程式。 Hotstar Taq  DNA Polymerase配合優化的緩衝體系,可最大程度的減少非專一放大和引子二聚體,帶來最高的靈敏度,非常適合於從複雜模版(基因體,cDNA)中放大低拷貝基因。PCR產物的3’端帶A,可克隆至T載體。
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圖1. 不同模版適應性測試

以10 ng人胎盤 總RNA進行反轉錄。將所得cDNA的1/10作為模版,分別用Taq和 Hotstar Taq 放大EGFR, IFN8R, IL-8, ILGF-1, p53基因。35個迴圈後,取1/4 PCR產物進行電泳。可以看出,對於中等拷貝數的IFN8R, IL-8和p53基因,熱啟動的 Hotstar Taq 可極大提高專一性和產量;對於低拷貝的EGFR和ILGF-1基因,只有用 Hotstar Taq 才能實現放大。
M: DNA Marker
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圖2.  靈敏度測試

Lane 1, DNA Marker;
Lane 2-8, 640 pg-10 pg人基因體DNA 2倍稀釋梯度;
Lane 9, NTC (No Template Control).