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TUNEL BrightGreen Apoptosis Detection Kit

訂購資訊 : ZGVA112-01 / 02 20rxn / 50rxn
產品特點:
• 經過優化的FITC-12-dUTP與未標記dNTP的比例,提高螢光檢測的信噪比和靈敏度
• 專利的Bright因子,使得螢光更亮,抗淬滅能力更強
• 高活性的重組TdT酶保證螢光摻入效率
• 適用於細胞爬片、石蠟切片和冰凍切片 

產品描述
細胞凋亡的一個顯著特點是細胞染色體的DNA被內源核酸內切酶有規律的降解成長度約為180-200bp的整倍數的片段。本試劑盒採用TUNEL (TdT mediated dUTP Nick End Labeling)法,應用末端去氧核糖核苷酸轉移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT)在凋亡細胞斷裂的DNA的3´-羥基(3´-OH)末端催化摻入螢光素-12-去氧三磷酸尿苷(FITC-12-dUTP)。FITC-12-dUTP標記的DNA可以用螢光顯微鏡直接觀察或者用流式細胞儀定量。試劑盒對標記反應進行了優化,採用最佳比例的FITC-12-dUTP和未標記dNTP進行3’-OH末端的核苷酸摻入,使得同一個斷裂的DNA片段末端可以形成更長的“標記尾巴”。該“標記尾巴”減少了相鄰摻入dNTP上標記基團的空間位元阻,增加每個斷裂片段上的螢光基團數目,降低螢光基團相鄰後可能造成的聚集和淬滅,從而提高檢測靈敏度,減少非專一性反應。TUNEL BrightGreen Apoptosis Detection Kit是TUNEL FITC Apoptosis Detection Kit的升級版本。試劑盒中的BrightGreen Labeling Mix包含FITC-12-dUTP以及專利的Bright因子。這種獨特的小分子化合物可非共價的與FITC結合,增強其穩定性,並使其信號放大,從而使得標記物更亮,抗淬滅能力更強。
Picture
小鼠肝臟組織。組織切片經DNase I處理後TUNEL染色。
AC分別為BrightGreen染色後於紫外光(460nm)下照射1min、3min、6min後拍照。DF分別為FITC染色後於紫外光(460nm)下照射1min、3min、6min後拍照。



TUNEL BrightRed Apoptosis Detection Kit

訂購資訊 : ZGVA113-01 / 02 20rxn / 50rxn
產品特點
• 標記紅色螢光,便於與GFP等其它綠色螢光共標記
• 經過優化的TMR red-dUTP與未標記dNTP的比例,提高螢光檢測的信噪比和靈敏度
• 專利的Bright因子,使得螢光更亮,抗淬滅能力更強
• 高活性的重組TdT酶保證螢光摻入效率
• 適用於細胞爬片、石蠟切片和冰凍切片


產品描述
細胞凋亡的一個顯著特點是細胞染色體的DNA被內源核酸內切酶有規律的降解成長度約為180-200bp的整倍數的片段。本試劑盒採用TUNEL (TdT mediated dUTP Nick End Labeling)法,應用末端去氧核糖核苷酸轉移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT)在凋亡細胞斷裂的DNA的3´-羥基(3´-OH)末端催化摻入四甲基羅丹明-去氧三磷酸尿苷(TMR red-dUTP)。TMR red-dUTP標記的DNA可以用螢光顯微鏡直接觀察或者用流式細胞儀定量。試劑盒對標記反應進行了優化,採用最佳比例的TMR red-dUTP和未標記dNTP進行3’-OH末端的核苷酸摻入,使得同一個斷裂的DNA片段末端可以形成更長的“標記尾巴”。該“標記尾巴”減少了相鄰摻入dNTP上標記基團的空間位元阻,增加每個斷裂片段上的螢光基團數目,降低螢光基團相鄰後可能造成的聚集和淬滅,從而提高檢測靈敏度,減少非特異性反應。TUNEL BrightRed Apoptosis Detection Kit中的BrightRed Labeling Mix包含TMR red-dUTP以及專利的Bright因子。這種獨特的小分子化合物可非共價的與TMR red結合,增強其穩定性,並使其信號放大,從而使得標記物更亮,抗淬滅能力更強。
Picture
圖. 小鼠骨骼肌注射誘導劑後產生凋亡。  A. TUNEL BrightRed染色,箭頭所指為凋亡細胞B. Merge,藍色為DAPI標記所有細胞。

TUNEL FITC Apoptosis Detection Kit

訂購資訊 : ZGVA111-01 / 02 20rxn / 50rxn
產品特點
• 經過優化的FITC-12-dUTP與未標記dNTP的比例,提高螢光檢測的信噪比和靈敏度
• 高活性的重組TdT酶保證螢光摻入效率
• 適用於細胞爬片、石蠟切片和冰凍切片
 

產品描述

細胞凋亡的一個顯著特點是細胞染色體的DNA被內源核酸內切酶有規律的降解成長度約為180-200bp的整倍數的片段。本試劑盒採用TUNEL (TdT mediated dUTP Nick End Labeling)法,應用末端去氧核糖核苷酸轉移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT)在凋亡細胞斷裂的DNA的3´-羥基(3´-OH)末端催化摻入螢光素-12-去氧三磷酸尿苷(FITC-12-dUTP)。FITC-12-dUTP標記的DNA可以用螢光顯微鏡直接觀察或者用流式細胞儀定量。試劑盒對標記反應進行了優化,採用最佳比例的FITC-12-dUTP和未標記dNTP進行3’-OH末端的核苷酸摻入,使得同一個斷裂的DNA片段末端可以形成更長的“標記尾巴”。該“標記尾巴”減少了相鄰摻入dNTP上標記基團的空間位元阻,增加每個斷裂片段上的螢光基團數目,降低螢光基團相鄰後可能造成的聚集和淬滅,從而提高檢測靈敏度,減少非特異性反應。

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右圖. 果蠅三齡幼蟲視盤(eye disc)。凋亡誘導基因Hid在專一性啟動子驅動下在果蠅視盤的遠端誘導出大量凋亡細胞。 A. TUNEL 染色,標記凋亡細胞。B. ELAV染色,標記所有的感光細胞。C. Merge。
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人睾丸組織切片經DNase I 處理。    A. TUNEL染色,標記凋亡細胞。B. PI染色,標記所有細胞核。C. Merge。

Annexin V-FITC / EGFP Apoptosis Detection Kit

訂購資訊 :
FITC : ZGVA211-01 / 02 50rxn / 100rxn
EGFP : ZGVA212-01 / 02 50rxn / 100rxn
產品特點 :
• 綠色螢光標記,可選擇FITC或EGFP
• 試劑盒中含有PI,可與Annexin V配合區分凋亡/壞死細胞
• 適用於流式細胞儀和螢光顯微鏡 

產品描述 :
在正常細胞中,磷脂醯絲氨酸(PS)只分佈在細胞膜脂質雙層的內側,而在細胞凋亡早期,細胞膜中的磷脂醯絲氨酸(PS)由脂膜內側翻向外側。 Annexin V是一種分子量為35~36kD 的Ca2+依賴性磷脂結合蛋白,與磷脂醯絲氨酸有高度親和力,故可通過細胞外側暴露的磷脂醯絲氨酸與凋亡早期細胞的胞膜結合。因此Annexin V被公認為檢測細胞早期凋亡的靈敏指標之一。將Annexin V進行綠色螢光(FITC或EGFP)標記,以標記了的Annexin V作為探針,利用螢光顯微鏡或流式細胞儀可檢測細胞凋亡的發生。碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)是一種核酸染料,它不能透過正常細胞或早期凋亡細胞的完整的細胞膜,但對凋亡中晚期的細胞和壞死細胞,PI能夠透過細胞膜而使細胞核染紅。因此將Annexin V與PI匹配使用,就可以將處於不同凋亡時期的細胞區分開來。在雙色流式細胞儀的散點圖上,左下象限顯示活細胞,右下象限為早期凋亡細胞,右上象限是凋亡晚期細胞和壞死細胞。
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圖2. 本產品能準確區分正常細胞、早期凋亡細胞和晚期凋亡細胞,並能對凋亡的細胞精准定量,特異性高。圖A-E分別用0, 0.5, 1.5, 4.5, 13.5 ng/ml的TRAIL (TNF-related apoptosis-inducing ligand) 處理Jurkat細胞3小時。 (F) 13.5 ng/ml TRAIL誘導Jurkat細胞凋亡3小時後,加入10 μg未標記的Annexin V封閉10分鐘,再用Annexin V-FITC/PI染色。未標記的Annexin V可以競爭Annexin V-FITC,證明瞭染色的專一性。


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